• 新聞資訊

    NEWS

    Nature Chemical Biology|通過(guò)酵母中的自主超突變快速產(chǎn)生有效抗體

    01-17

    AHEAD可以實(shí)現抗體在酵母傳代過(guò)程中的自突變,在短短兩周內實(shí)現親和力成熟。此技術(shù)的進(jìn)一步成熟以及商業(yè)化也許可以促進(jìn)抗體藥物發(fā)現進(jìn)程,加速抗體研發(fā)效率降低實(shí)驗成本。

        AHEAD可以實(shí)現抗體在酵母傳代過(guò)程中的自突變,在短短兩周內實(shí)現親和力成熟。此技術(shù)的進(jìn)一步成熟以及商業(yè)化也許可以促進(jìn)抗體藥物發(fā)現進(jìn)程,加速抗體研發(fā)效率降低實(shí)驗成本。



    NEWS


    技術(shù)解讀

    構建酵母超突變系統

        增加獨立于正常DNA復制體系的OrthoRep模塊,其中關(guān)鍵在于正交易錯DNA聚合酶會(huì )復制一個(gè)特殊的細胞質(zhì)質(zhì)粒P1,其突變率比正常的DNA聚合酶高100000倍。當納米抗體片段在P1上編碼時(shí)會(huì )隨著(zhù)酵母的不斷傳代穩定產(chǎn)生突變。這套胞內超突變系統可以在短時(shí)間內建立超大文庫。

    構建酵母展示篩選系統

        將納米抗體基因放在A(yíng)ga2融合多肽的N末端,之后分泌表達并展示在酵母表面。注:作者通過(guò)引入新的P1載體的特異性啟動(dòng)子,使用更強的分泌前導并在納米抗體下游加入一個(gè)多聚腺苷,將納米抗體的表面展示水平提高了約25倍。整體的篩選流程只需要在酵母培養與FACS之間循環(huán)即可進(jìn)行快速篩選。


    應用案例

    使用AHEAD進(jìn)化SARS-CoV-2抗體

        如上圖,經(jīng)過(guò)AHEAD 3~8個(gè)循環(huán)后,8個(gè)弱親和力的抗體均進(jìn)化得到了更高親和力的多突變納米抗體,最高提升約580倍,得到最高親和力Kd=0.72nM。經(jīng)過(guò)中和SARS-CoV-2假病毒實(shí)驗驗證其中大多數具有優(yōu)秀的病毒中和能力,最大抑制濃度IC50=0.52nM。




    優(yōu)點(diǎn)

    1. 相對于傳統抗體發(fā)現技術(shù)與篩選技術(shù),AHEAD在效率與成本上體現出明顯的優(yōu)勢。

    2.超高的庫容量可以對更大的序列空間進(jìn)行搜索。

    3.可以將一個(gè)文庫作為起始進(jìn)行突變并且進(jìn)行高通量篩選,從而探索更多的進(jìn)化路線(xiàn)。


    缺點(diǎn)

    1.可能會(huì )在載體上非抗體部分引入突變從而降低篩選效率。

    2.不能在特定的CDR區進(jìn)行突變,雖然可以發(fā)現在非CDR區的部分突變組合可以提高親和力,但同時(shí)也會(huì )增加可成藥性的風(fēng)險。


    思考

    1.也許這套系統會(huì )更加適合其他蛋白質(zhì)的定向進(jìn)化,如酶改造、細胞因子改造、de novo小蛋白親和力成熟等。

    2.關(guān)于納米抗體篩選中的成藥性風(fēng)險也許可以結合AI模型來(lái)解決,當然科學(xué)且嚴謹的臨床前實(shí)驗才是檢驗真理的唯一標準。

    3.這套系統的超突變方法與高通量篩選方法還有進(jìn)一步優(yōu)化的空間


        在藥物發(fā)現的過(guò)程中,各種先進(jìn)有效的手段被用來(lái)探索更多的可能性,我們堅信這些新技術(shù)的融合會(huì )徹底并深刻地改變藥物發(fā)現的進(jìn)程。未來(lái)AIBIOROBOTS會(huì )專(zhuān)注在A(yíng)I、生物藥、自動(dòng)化實(shí)驗領(lǐng)域分享更多有趣的內容。關(guān)于A(yíng)HEAD后續會(huì )有進(jìn)一步的硬核技術(shù)分享。


      聯(lián)系我們

      0571-89059592

      郵箱:info@genekine.com.cn

      地址:浙江省杭州市余杭區文一西路 1500號6號樓6單元1001

    掃一掃,關(guān)注微信公眾平臺

    杭州菁因康生物科技有限公司 | 浙ICP備15033920號 | 技術(shù)支持:杭州瑞梵科技

    杭州菁因康生物科技有限公司

    掃描二維碼分享到微信

    在線(xiàn)咨詢(xún)
    聯(lián)系電話(huà)

    0571-89059592

    亚洲 校园 欧美 国产 另类,精品亚洲成a人片在线观看,亚洲日产韩国一二三四区,亚洲熟妇色XXXXX欧美老妇Y