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    IgG全長(cháng)抗體酵母展示

    展示技術(shù)廣泛用于抗體的高通量篩選。目前常用的噬菌體展示和酵母展示技術(shù)主要用于展示單鏈可變區抗體片段(ScFv),通過(guò)展示技術(shù)篩選出的抗體片段,需要進(jìn)行結構轉換,將抗體片段結構轉換成IgG全長(cháng)抗體結構,應用于抗體藥物開(kāi)發(fā)。但是通過(guò)結構轉換形成的IgG全長(cháng)抗體可能會(huì )失去活性,需要對轉換后的IgG全長(cháng)抗體進(jìn)一步進(jìn)行體外成熟優(yōu)化,才能篩選出具有高親和力的抗體。最直接有效的策略是通過(guò)展示IgG全長(cháng)抗體,進(jìn)行體外親和力成熟優(yōu)化篩選。動(dòng)物細胞可以用于展示IgG全長(cháng)抗體,進(jìn)行體外親和力成熟優(yōu)化篩選。但是與噬菌體展示和酵母展示技術(shù)相比,動(dòng)物細胞展示技術(shù)通量小,操作難度大,周期長(cháng),成本高,無(wú)法高效達到體外親和力成熟的目標。

    我們基于糖工程畢赤酵母技術(shù),用糖工程畢赤酵母代替動(dòng)物細胞,開(kāi)發(fā)出IgG全長(cháng)抗體酵母展示技術(shù)平臺,用它可以代替噬菌體和傳統的酵母展示技術(shù),構建大容量人源IgG全長(cháng)抗體庫,進(jìn)行高通量親和力體外成熟篩選,選出的高親和力、高表達IgG全長(cháng)抗體不需要結構形式改變,可以直接表達生產(chǎn)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗和臨床實(shí)驗,是一種穩定高效的抗體親和力成熟系統。

    我們是目前全球少數幾家能提供IgG全長(cháng)抗體酵母展示技術(shù)的企業(yè),可以對外提供涵蓋抗體人源化、抗體親和力成熟、抗體表達生產(chǎn)在內的抗體基因工程改造一站式服務(wù)。


    IgG全長(cháng)抗體酵母展示技術(shù)具有其他展示技術(shù)沒(méi)有的潛在優(yōu)勢

    1、糖工程畢赤酵母具有類(lèi)似于動(dòng)物細胞的真核表達系統質(zhì)量控制機制,能夠確??贵w的正確空間結構折疊,具有人源N-糖基化等多種翻譯后加工功能,因而展示的IgG抗體在分子結構、理化特性 和生物學(xué)功能方面最接近于天然抗體,可以直接用于動(dòng)物實(shí)驗和臨床試驗。但是噬菌體是原核表達系統,只能展示ScFv等抗體片段,通過(guò)結構轉換形成的IgG抗體可能會(huì )失去活性。

    2、與動(dòng)物細胞展示技術(shù)相比,IgG全長(cháng)抗體酵母展示技術(shù)具有抗體庫容量大,操作簡(jiǎn)單,周期短,成本低,能高通量篩選IgG全長(cháng)抗體。

    3、酵母展示系統采用FACS分選技術(shù),基于IgG抗體親和力及展示水平進(jìn)行篩選,可以消除表達水平不同引起的偏差,而且能區分親和力差異很小的克隆。但是噬菌體展示篩選抗體時(shí),表達水平的不同會(huì )影響抗體親和力的篩選。

    4、采用FACS分選技術(shù)能夠一次直接分選高、中、低親和力的克隆。

    5、通過(guò)使用雙染色的FACS,可以直接用酵母展示抗體確定抗體親和力,不需要進(jìn)行耗時(shí)的亞克隆、表達和純化。

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